Production de la GFP mutée Flashcards Preview

TP biologie moléculaire > Production de la GFP mutée > Flashcards

Flashcards in Production de la GFP mutée Deck (7)
Loading flashcards...
1
Q

De quoi est constitué un système d’expression in vivo?

A

Vecteur d’expression

Organisme «hôte» compatible

2
Q

Quel est l’organisme hôte le plus fréquemment utilisé?

A

Escherichia coli

3
Q

Pourquoi l’organisme hôte le plus fréquemment utilisé est E. coli?

A

Peu exigeante en culture
Bien caractérisée génétiquement
(pls souches améliorées génétiquement pour optimiser la production de prots recombinantes)

4
Q

Quel promoteur contrôle l’expression de la GFP dans le plasmide créé au lab par assemblage de Gibson?

A

PBAD : promoteur inductible par arabinose

5
Q

Que produit le gène araC?

A

Protéine de régulation AraC

6
Q

En absence d’arabinose, quelle forme prend la protéine AraC? Que cela entraîne-t-il pour l’expression du gène?

A

Forme de dimère avec une autre prot AraC : liées à 2 sites distants dans ADN : forme un «loop» qui bloque accessibilité du promoteur au gène : pas (ou peu) d’expression du gène

7
Q

En présence d’arabinose, quelle forme prend la protéine AraC? Que cela entraîne-t-il pour l’expression du gène?

A

Dimère AraC se lie à arabinose et délaisse ADN : chg de structure qui facilite liaison de ARN pol à promoteur PBAD : activation de la transcription du gène de la GFP